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粗蛋白測定原理

時(shí)間:2022-06-09   訪問量:1785

蛋白質(zhì)是由碳、氫、氧、氮及少量硫元素組成。這些元素在蛋白質(zhì)中含量都有一定比例關(guān)系,其中含碳50~55%、氫6~8%、氧20~23%、 氮15~ 17%和硫0.3~2.5%。 此外在某些蛋白質(zhì)中還含有微量的磷、鐵、鋅、銅和鉬等元素。由于氮元素是蛋白質(zhì)區(qū)別于糖和脂肪的特征,而且絕大多數(shù)蛋白質(zhì)的氮元素含量相當(dāng)接近,一般恒定在15~17%,平均值為16%左右,因此在蛋白質(zhì)的定量分析中,每測得1克氮就相當(dāng)于6.25克蛋白質(zhì)。所以只要測定出生物樣品中的含氮量,再乘以6.25,就可以計(jì)算出樣品中的蛋白質(zhì)含量。含氮有機(jī)物與濃硫酸共熱,被氧化成二氧化碳和水,而氮?jiǎng)t轉(zhuǎn)變成氨,氮進(jìn)一步 與硫酸作用生成硫酸銨。

由大分子分解成小分子的過程通常稱為”消化”。為了加速消化,通常需要加入硫酸鉀或硫酸鈉以提高消化液的沸點(diǎn)(290"C→400°C),加入硫酸銅作為催化劑, .過氧化氫作為氧化劑,以促進(jìn)反應(yīng)的進(jìn)行。反應(yīng)燒瓶內(nèi)完成,反應(yīng)在蒸餾裝置中進(jìn)行,其特點(diǎn)是將蒸汽發(fā)生器、蒸餾器及冷凝器三個(gè)部分融為一體。由于蒸汽發(fā)生器體積小,節(jié)省能源,本儀器使用方便,效果良好。硫酸銨與濃堿作用可游離出氨,借水蒸氣將產(chǎn)生的氨蒸餾到一定濃度的硼酸溶液中,硼酸吸收氨后使溶液中的H濃度降低,然后用標(biāo)準(zhǔn)無機(jī)酸滴定,直至恢復(fù)溶液中原來H濃度為止,最后根據(jù)所用標(biāo)準(zhǔn)酸的量計(jì)算出待測物中總氮量。


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